N.GJC23048 - Unveiling the molecular functions of CCDC32: a tDARK associated with non-specific syndromic intellectual disability and uncommon congenital abnormalities

Questa richiesta di finanziamento mira a decifrare le funzioni molecolari di CCDC32, un enigmatico tDARK associato a disabilità intellettiva sindromica non specifica e ad anomalie congenite poco frequenti. Riducendo l'espressione di CCDC32 in neuroni primari e cellule della glia, intendiamo svelare il suo ruolo centrale nella fisiologia cerebrale. Analizzeremo le conseguenti alterazioni fisiologiche neuronali, tra cui lo sviluppo dei neuriti e l'impatto di sul riciclo delle vescicole sinaptiche. Inoltre, utilizzando una microscopia a super-risoluzione all'avanguardia, esamineremo meticolosamente la localizzazione subcellulare di CCDC32 taggata in diversi tipi di cellule. Questi esperimenti forniranno indicazioni sulla sua distribuzione spazio-temporale e sulle potenziali collaborazioni funzionali. Attraverso una serie di analisi proteomiche approfondite, ci proponiamo di svelare la cascata di cambiamenti molecolari che seguono la downregulation di CCDC32, facendo luce sui suoi effettori a valle e sulle vie cellulari. Questa esplorazione preliminare pone le basi per indagini più raffinate sulle implicazioni patologiche di CCDC32. In definitiva, il nostro approccio globale aprirà la strada a studi futuri per chiarire l'esatto contributo di CCDC32 allo sviluppo di disabilità intellettive sindromiche non specifiche e anomalie congenite non comuni, favorendo una comprensione più approfondita dei disturbi intellettivi.

This grant proposal aims to decipher the molecular functions of CCDC32, an enigmatic tDARK associated with non-specific syndromic intellectual disability and infrequent congenital abnormalities. By downregulating CCDC32 expression in primary neurons and glia cells, we intend to unravel its pivotal role in brain physiology. We will investigate the ensuing neuronal physiological alterations, including the development of neurites and the protein's impact on synaptic vesicle recycling. In addition, employing cutting-edge super resolution microscopy, we will meticulously examine the subcellular localization of tagged CCDC32 across diverse cell types. These experiments will provide insights into its spatiotemporal distribution and potential functional partnerships. Through comprehensive proteomic analyses, we aim to unravel the cascade of molecular changes following CCDC32 downregulation, shedding light on its downstream effectors and cellular pathways. This preliminary exploration lays the foundation for more refined investigations into the pathological implications of CCDC32. Ultimately, our comprehensive approach will pave the way for future studies to elucidate the precise contribution of CCDC32 to the development of non-specific syndromic intellectual disability and uncommon congenital abnormalities, fostering a deeper understanding of intellectual disorders.